Ketika penelitian medis menjadi lebih maju, para ilmuwan harus menggunakan teknologi yang lebih kompleks untuk mengidentifikasi, memisahkan, dan mempersiapkan sel untuk aplikasi hilir. Dua metode populer untuk ini termasuk sitometri aliran dan penyortiran sel yang diaktifkan fluoresensi (FACS).

https://nanocellect..com

Sementara masing-masing memanfaatkan teknik hamburan cahaya dan sampel sel yang mengalir melalui sinar laser, ada beberapa perbedaan utama yang membedakan kedua proses tersebut. Berikut ini adalah perbedaan FACS dan flow cytometry.

Flow cytometry

Tujuan utama dari flow cytometry adalah untuk mengumpulkan analisis yang komprehensif dari sampel sel tertentu. Flow cytometry memungkinkan peneliti untuk mengumpulkan data statistik tentang populasi sel individu dari campuran heterogen.

Metode flow cytometry

Flow cytometry menganalisis sel menggunakan alat yang disebut flow cytometer. Sebuah flow cytometer menyalurkan sel sampel melalui saluran sempit satu per satu dengan sistem fluidiknya.

Sel kemudian melewati sistem optik. Serangkaian lampu dan sensor yang dapat mendeteksi karakteristik sel berdasarkan hamburan cahaya vertikal dan horizontal.

Semua data ini disimpan dan diproses oleh komponen ketiga dan terakhir dari sitometer, sistem elektronik, sebelum sel dibuang. Ketiga bagian ini bekerja sama untuk memberikan representasi statistik populasi dalam sampel sel.

Populasi target juga dapat diidentifikasi dengan lebih spesifik dengan menggunakan antibodi dan antigen. Dengan menandai antibodi dengan pewarna fluoresen dan mengikatnya ke sel penyaji antigen, sitometer dapat mengenalinya sebagai yang berbeda dari sampel lainnya.

Kegunaan flow cytometry

Perbedaan FACS dan flow cytometry dapat dilihat dari kegunaannya. Flow cytometry digunakan untuk mengindeks sampel sel, termasuk sampel biologis kaya kekebalan seperti sumsum tulang, darah tepi, dan biofluida lainnya.

Jenis sampel ini biasanya mengandung sel imun dengan konsentrasi tinggi, yang berharga untuk penelitian imunologi dan analisis diagnostik untuk memajukan penemuan ilmiah, mengumpulkan informasi tentang pasien tertentu, atau membantu menentukan kemanjuran terapi dan perawatan baru.

FACS (Fluorescence activated cell sorting)

Analisis penyortiran sel teraktivasi fluoresensi (FACS) merupakan turunan dari flow cytometry yang berjalan ke arah yang sedikit berbeda.

Tujuan utama FACS adalah untuk secara fisik menyortir sampel sel yang heterogen ke dalam populasi yang terpisah. Sel yang diisolasi kemudian dapat digunakan untuk penelitian lebih lanjut.

Metode FACS

Perbedaan FACS dan flow cytometry dilihat dari prosesnya, proses FACS mirip dengan flow cytometry tetapi melibatkan langkah ekstra. Sementara sel masih ditandai dengan antibodi fluoresen dan disalurkan satu per satu melalui flow cytometer, mereka juga disortir.

Alih-alih dibuang setelah pengumpulan data, modifikasi perangkat tambahan memisahkan populasi unik ke dalam wadahnya sendiri. Sampel sel terisolasi ini dapat dipelajari atau dimanfaatkan untuk aplikasi praktis.

FACS adalah metode pemisahan sel yang populer karena dapat mengurutkan sampel yang besar dan beragam. Ketika berhadapan dengan campuran yang relatif kompleks, FACS memungkinkan peneliti untuk memilah sampel secara efektif dan hanya mempertahankan sel yang diinginkan.

Namun, tergantung pada sampel yang sedang diproses dan bagaimana persiapannya, FACS dapat memakan banyak waktu untuk memproses dan menyortir sampel, dan keluarannya terbatas. Ini juga membutuhkan akses ke peralatan mahal dan personel terlatih untuk menggunakannya.

Prosedur FACS juga membutuhkan populasi awal yang besar karena mengisolasi melalui seleksi positif, menargetkan sel yang diinginkan.

Karena potensi kehilangan banyak sel selama proses berlangsung, peneliti harus memulai dengan banyak sel jika mereka berharap untuk mengakhiri dengan populasi yang cukup. Throughput keseluruhan juga dikurangi dengan pergeseran.

Pergeseran terjadi ketika membran sel pecah karena cairan yang bergerak cepat. Semakin banyak sel yang mati, sisa-sisa ekstraselulernya mulai menumpuk di dalam tabung dan menyebabkan penyumbatan. Penyumbatan ini dapat menyebabkan penyortiran yang tidak akurat dan bahkan lebih banyak kematian sel.

Bergantung pada populasi sel, mungkin bermanfaat untuk menggunakan metode pemisahan sel yang berbeda atau untuk mengoptimalkan sampel sebelum pemrosesan FACS untuk membuang sel mati dan memperkaya sel yang diinginkan sebelum memulai pengurutan aliran.

Kegunaan FACS

FACS merupakan teknik pemisahan sel, artinya digunakan ketika tujuannya adalah untuk memisahkan sel menjadi populasi yang terisolasi. Alasan FACS digunakan sebagai lawan dari flow cytometry adalah karena peneliti memiliki penggunaan hilir untuk sel yang diurutkan.

Flow cytometry membantu mengumpulkan data, FACS menyiapkan sampel untuk aplikasi hilir. Aplikasi tersebut dapat mencakup penelitian lebih lanjut atau sampel terisolasi yang digunakan untuk perawatan medis.

Semoga informasi mengenai perbedaan FACS dan flow cytometry bisa bermanfaat.

Website || Syaf.co.id