Pemurnian protein dilakukan untuk mempelajari dan mengetahui protein secara detail. Simak informasi mengenai pemurnian protein dan cara kerjanya pada artikel berikut ini.

https://www.tebu-bio.com/

Ketahui tentang pemurnian protein

Dalam biokimia, protein merupakan polimer asam amino yang tersusun dalam bentuk rantai polipeptida. Protein memainkan peran integral dalam struktur dan fungsi sel.

Namun, untuk mempelajari protein, penting untuk mengidentifikasi dan mengisolasinya terlebih dahulu. Untuk mencapai ini, ahli biokimia melakukan apa yang secara teratur dikenal sebagai pemurnian protein throughput tinggi.

Pertama, protein individu diisolasi kemudian dipisahkan berdasarkan berat molekul, kelarutan, muatan, dan afinitas pengikatan spesifik. Proses ini membantu peneliti menganalisis protein individu dan mempelajari karakterisasi dan interaksi protein.

Pemurnian protein dapat didefinisikan sebagai serangkaian langkah yang dilakukan untuk memperoleh dan mempelajari protein yang diinginkan dari suatu campuran kompleks. Mengisolasi protein akan membantu dalam analisis protein yang meliputi beberapa hal berikut ini:

• Ukuran dan struktur
• Afinitas yang mengikat
• Aktivitas biologis
• Sifat fisio-kimia
• Interaksi protein-protein

Proses ini memiliki banyak aplikasi eksperimental, terutama dalam produksi protein rekombinan skala besar. Namun, pemurnian protein asli kadang menantang untuk dilakukan. Dalam kasus seperti itu, tag afinitas seperti Polyhistidine, Glutathione-S-transferase, dan tag-nya digunakan untuk mengisolasi dan imobilisasi mereka.)

Pemurnian protein dan cara kerjanya

Untuk berhasil mengisolasi protein, maka perlu menjalani serangkaian proses pemurnian protein. Langkah-langkah umum dari proses pemurnian protein diuraikan di bawah ini:

Lisis sel

Lisis sel adalah gangguan sel dan denaturasi protein menggunakan berbagai metode enzimatik (protease inhibitor), metode kimia (deterjen), atau metode fisik (sonikasi). Akibatnya, lisat sel akan mengandung protein larut dan tidak larut, asam nukleat, debris sel, organel, dan sisa-sisa membran.

Klarifikasi

Tujuan dari proses klarifikasi adalah untuk mendapatkan hanya protein yang akan dimurnikan. Untuk melakukannya, sel menjalani langkah klarifikasi berikutnya untuk menghilangkan semua kontaminan. Hal tersebut dicapai dengan filtrasi atau sentrifugasi. Setelah tercapai, ekstrak protein siap untuk konsentrasi.

Pengikatan protein

Langkah selanjutnya adalah mengisolasi protein dari ekstrak. Hal ini juga kadang-kadang disebut tahap pemulihan. Di sini, protein diisolasi dengan mengikat molekul protein ke matriks. Hal tersebut dilakukan dengan teknik seperti kromatografi afinitas dan pemisahan manik magnetik.

Elusi

Pemurnian protein dan cara kerjanya setelah pengikatan protein yaitu elusi. Elusi adalah proses mengekstraksi satu bahan yang teradsorpsi ke yang lain dengan mencuci dengan pelarut. Buffer elusi yang sesuai digunakan untuk menghilangkan semua ikatan non-spesifik pada kolom. Jumlah dan lama pencucian akan tergantung pada jenis kolom yang digunakan.

Elusi protein yang diinginkan dilakukan dengan mengubah pH kolom. Gugus fungsi protein yang bermuatan dinetralkan dan dengan demikian mereka dapat diekstraksi.

Proses ini melibatkan penggunaan buffer elusi dan reagen seperti imidazol (digunakan dalam protein tag-nya), yang secara efektif mengelusi protein target dalam konsentrasi tinggi. Proses ini membantu peneliti mendapatkan konsentrasi protein tinggi untuk analisis lebih lanjut.

Itulah informasi mengenai pemurnian protein dan cara kerjanya. Semoga informasi yang kami berikan bisa memperluas wawasan Anda. Syaf Unica Indonesia menyediakan produk yang membantu pemurnian protein dan preparasi sampel.

Produk berkualitas tinggi yang kami sediakan dari expedeon dapat membantu Anda dengan pemurnian antibodi, tag afinitas, penghapusan asam nukleat, validasi ekspresi protein, dan pembelahan dan penghambatan enzim protease yang dapat memodifikasi protein.

Untuk mendapatkan produk tersebut silakan kunjungi katalog produk kami atau klik di sini https://syaf.co.id/product/protein-purification-and-sample-preparation/.

 

WEBSITE || SYAF.CO.ID