ELISA dan western blot merupakan teknik yang dilakukan untuk mendeteksi HIV. Namun, keduanya memiliki persamaan dan perbedaan. Pelajari selengkapnya mengenai perbandingan ELISA dan western blot berikut ini.
https://www.selectscience.net/
Mengenal ELISA
ELISA merupakan singkatan dari enzyme-linked immunosorbent assay. ELISA merupakan tes pertama yang dirancang terutama untuk deteksi HIV. Ini adalah uji berbasis pelat. ELISA digunakan untuk mendeteksi antibodi HIV dan tes ini menunjukkan sensitivitas yang tinggi.
Dalam teknik ini, antigen dalam sampel mengikat dengan antibodi amobil pada permukaan padat. Antigen membentuk kompleks dengan antibodi yang terkait dengan enzim setelah diimobilisasi. Enzim terkonjugasi tersebut, selanjutnya diinkubasi dengan substrat masing-masing.
Reaksi enzim-substrat menghasilkan produk berwarna yang terukur. Dengan mengukur jumlah produk, jumlah antigen yang ada dalam sampel dapat diukur. Oleh karena itu, ELISA menjadi teknik yang sangat spesifik dan canggih yang memerlukan perhatian teknisi yang terampil. Namun, merupakan proses yang memakan waktu dengan persyaratan peralatan canggih.
Mengenal Western Blot
Western blotting merupakan teknik yang memungkinkan deteksi protein tertentu dari campuran protein. Western blot yaitu membran yang digunakan selama prosedur blotting untuk mendapatkan bayangan cermin dari pola protein dalam gel SDS-poliakrilamida.
Western blotting menggunakan membrane yang sebagian besar terdiri dari nitroselulosa atau polivinilidena difluorida (PVDF). Untuk mengidentifikasi protein tertentu, dapat digunakan membrane dengan protein yang ditransfer.
Antibodi berkualitas tinggi diperlukan untuk mendeteksi protein yang diinginkan dengan hibridisasi. Antibodi berikatan dengan antigen spesifiknya dan menunjukkan adanya antigen yang diinginkan, yaitu protein.
Pemindahan protein dari gel poliakrilamida SDS ke western blot dilakukan dengan elektroblotting. Ini adalah metode yang efektif dan cepat yang menyebabkan protein terelektroforesis keluar dari gel dan melewati membran nitroselulosa (western blot).
Western blotting berguna untuk melakukan deteksi antibodi anti-HIV dalam sampel serum manusia. Kegunaan lain dari western blot yaitu sebagai tes konfirmasi untuk infeksi Hepatitis B dan tes definitif untuk penyakit sapi gila.
Persamaan ELISA dan western blot
Sebelum melakukan perbandingan ELISA dan western blot, berikut ini adalah beberapa persamaan dari kedua teknik tersebut:
- Kedua metode tersebut merupakan jenis teknik yang digunakan untuk mendiagnosis HIV.
- Kedua metode didasarkan pada imunodeteksi.
- ELISA dan western blot didasarkan pada pembentukan kompleks antibodi-protein.
- Kedua metode dapat menganalisis protein.
- ELISA dan western blotting adalah teknik yang memakan waktu.
- Personil yang terlatih dan terampil diperlukan untuk melakukan teknik ini.
Perbedaan ELISA dan western blot
Perbedaan dan perbandingan ELISA dan western blot apabila ditinjau dari beberapa aspek yaitu sebagai berikut:
Definisi
ELISA merupakan metode yang sangat sensitif dan sangat canggih untuk mendeteksi keberadaan antigen dan antibodi dalam darah pasien. Sementara western blot merupakan teknik yang mendeteksi protein tertentu dari campuran protein.
Kuantitatif atau kualitatif
ELISA bersifat kuantitatif dan juga kualitatif. Sementara western blot bersifat kualitatif dan kadang-kadang semi-kuantitatif.
Waktu yang diperlukan
Teknik ELISA membutuhkan waktu lama, namun teknik western blot membutuhkan waktu yang lebih lama dari ELISA.
Fungsi
ELISA tidak menggunakan elektroforesis gel. Sementara itu, western blot menggunakan elektroforesis gel untuk melakukan ekstraksi protein.
Biaya
Teknik ELISA lebih hemat biaya dalam pelaksanaannya. Sedangkan teknik western blot membutuhkan biaya yang lebih besar.
Itulah perbandingan ELISA dan western blot yang perlu Anda ketahui. Dapatkan berbagai alat kesehatan di Syaf Unica Indonesia. Kami juga menyediakan reagen western blot yang dapat Anda beli langsung di sini https://syaf.co.id/product/western-blot-reagents/.
Terima kasih telah mengunjungi website kami, semoga informasi tersebut bermanfaat untuk Anda.