Pemrosesan jaringan melalui beberapa tahapan. Pada artikel kali ini kami akan membahas mengenai tahap-tahap pemrosesan jaringan.

http://stevegallik.org/

Tahap-tahap Pemrosesan Jaringan

DEHIDRASI

Tahap pertama dalam pemrosesan jaringan yaitu dehidrasi (penghilangan air). Dalam jaringan, air hadir dalam bentuk bebas dan terikat yang perlu dihilangkan sebelum pemrosesan dapat dilanjutkan.

Dehidrasi biasanya dilakukan dengan menggunakan alkohol (seperti etanol) tetapi ini dapat melarutkan komponen seluler tertentu seperti lipid. Meskipun dehidrasi juga dapat menyebabkan penyusutan jaringan, tahap ini diperlukan dalam semua metode infiltrasi, kecuali jaringan yang didukung oleh media embedding berair (seperti lilin yang larut dalam air).

Dalam pemrosesan lilin parafin, dehidrasi dari fiksatif berair seperti formalin biasanya dimulai dalam alkohol 70% sebelum berkembang melalui 90% -95% menjadi alkohol absolut sebelum melanjutkan ke tahap pembersihan.

Namun, transfer langsung ke alkohol 95% sering dilakukan jika jaringan cukup terfiksasi. Durasi dehidrasi tergantung pada ketebalan jaringan. Semakin tebal balok, semakin lama waktunya. Umumnya, balok setebal 1 mm membutuhkan waktu hingga 30 menit, sedangkan balok setebal 5 mm membutuhkan waktu hingga 90 menit atau lebih dalam setiap pergantian.

CLEARING

Clearing merupakan tahap pemrosesan jaringan transisi antara dehidrasi dan infiltrasi dengan media tanam. Meskipun jaringan bebas air setelah dehidrasi, infiltrasi dengan lilin tidak dapat dilakukan karena lilin dan etanol sebagian besar tidak dapat bercampur.

Banyak dehidran yang tidak dapat bercampur dengan lilin parafin dan pelarut (zat pembersih atau medium ante) yang dapat bercampur dengan zat pendehidrasi dan media penyisipan digunakan untuk membantu transisi di antara langkah-langkah ini.

Agen kliring adalah pelarut lemak dan itu menghilangkan lemak dari jaringan. Harus diperhatikan bahwa penyusutan terjadi ketika jaringan dipindahkan dari bahan pendehidrasi ke bahan pembersih dan dari bahan pembersih ke lilin.

Pada tahap akhir, penyusutan dapat terjadi akibat ekstraksi lemak oleh zat pembersih. Xylene adalah agen kliring yang paling populer dan beberapa perubahan itu diperlukan untuk sepenuhnya menggantikan etanol.

Pilihan bahan pembersih tergantung pada jenis pengolah jaringan yang digunakan, kondisi pemrosesan seperti suhu, faktor keamanan dan biaya.

INFILTRASI DAN EMBEDDING

Infiltrasi

Infiltrasi merupakan kejenuhan rongga-rongga jaringan dan sel-sel oleh suatu zat pendukung yang umumnya merupakan media di mana mereka akhirnya tertanam. Agen pilihan yang paling umum adalah lilin parafin yang cair saat panas dan padat saat dingin.

Sebuah media infiltrasi dan embedding idealnya harus cair antara 30°C dan 60°C dan cocok untuk pemotongan. Selain itu, sifat medium harus serupa dengan jaringan yang akan dipotong sehubungan dengan kepadatan dan elastisitas.

Penggunaan infiltrasi vakum sering digunakan untuk membantu menyelesaikan impregnasi jaringan dengan lilin. Ini dilakukan dengan menggunakan lilin cair atau media lain di bawah tekanan rendah.

Bantuan vakum membantu tidak hanya mengurangi waktu jaringan terkena panas tetapi juga membantu menghilangkan pelarut yang tersisa. Pemroses jaringan modern dilengkapi untuk memberikan vakum dan tekanan selama pemrosesan jaringan.

Embedding

Penanaman parafin adalah metode standar yang digunakan di laboratorium histologi untuk menghasilkan blok jaringan untuk pemotongan bagian (mikrotomi).

Proses ini biasanya dilakukan dengan menggunakan embedding center dan melibatkan jaringan sekitarnya dengan media seperti lilin parafin yang ketika didinginkan dan dipadatkan akan memberikan dukungan yang cukup untuk pemotongan bagian atau mikrotomi.

Produksi blok yang berorientasi dengan benar dan diberi label secara akurat adalah salah satu keterampilan penting dari ahli histologi terlatih dan mencakup pengetahuan dan pemahaman di berbagai bidang seperti pengambilan sampel jaringan, identifikasi, dan anatomi manusia.

MIKROTOMI

Tahap pemrosesan jaringan selanjutnya yaitu mikrotomi. Mikrotom merupakan alat yang digunakan untuk memotong irisan atau bagian jaringan yang sangat tipis untuk studi mikroskop cahaya. Mikrotom menggunakan pisau baja, kaca, atau berlian tergantung pada spesimen dan ketebalan bagian yang diperlukan.

Saat ini, pisau baja sekali pakai umumnya digunakan untuk mempersiapkan bagian parafin jaringan untuk histologi mikroskop cahaya.

Semoga informasi mengenai tahap-tahap pemrosesan jaringan bisa bermanfaat untuk Anda.

Website || Syaf.co.id