https://rsscience.com/mount-a-slide-look-at-your-cheek-cellls

 

Untuk meningkatkan kontras pada bagian jaringan yang biasanya tidak berwarna, bagian jaringan biasanya diwarnai. Untuk pemeriksaan mikroskopis cahaya, agen berwarna (kromofor) digunakan. Untuk mikroskop elektron, garam logam berat padat elektron digunakan (misalnya, timbal sitrat, uranil asetat).

Ahli histologi paling awal menggunakan pewarna alami untuk menodai bagian mereka. Dengan penemuan pewarna kimia, semakin banyak jenis noda yang tersedia.

Sifat zat pewarna untuk pemeriksaan mikroskopis

Zat warna tertentu bersifat basa atau asam. Hal ini karena zat warna sintetik dibuat sedemikian rupa sehingga bagian pewarnaan zat warna bersifat asam (anionik) atau basa (kationik) dalam perilaku kimianya.

– Pewarna basa : [pewarna]⁺ OH^–

Pewarna kationik atau basa memiliki afinitas untuk inti dan ribosom yang ada di jaringan dengan muatan negatif bersih dan disebut basofilik.

– Pewarna asam : [pewarna]^– H⁺

Pewarna anionik atau asam memiliki afinitas untuk sitoplasma bermuatan positif dan komponen lain seperti mitokondria dan silia, yang kemudian disebut struktur asidofilik.

Jenis pewarna untuk pemeriksaan mikroskopis

Berikut ini adalah beberapa pewarna yang digunakan dalam histologi mikroskopis cahaya. Beberapa digunakan untuk tujuan umum dan beberapa digunakan untuk secara khusus menunjukkan bahan tertentu dalam beberapa bagian.

1. Pewarnaan H&E (Hematoxylin dan Eosin)

Ini menjadi kombinasi pewarna tujuan umum yang paling banyak digunakan dan penting. Keduanya digunakan setelah fiksasi apapun kecuali fiksasi dengan osmium tetroksida. Hematoxylin, produk pewarna alami, bertindak sebagai pewarna basa yang menodai warna biru atau hitam.

Pewarna anilin, eosin, adalah pewarna asam yang mewarnai sitoplasma, otot, dan jaringan ikat berbagai warna merah muda dan oranye. Perbedaan intensitas pewarnaan ini berguna untuk membedakan satu jaringan dengan jaringan lainnya.

2. Pewarna Lee (Methylene Blue dan Basic Fuchsin)

Pewarnaan ini sering digunakan untuk pewarnaan jaringan tujuan umum, karena lebih baik untuk jaringan otot daripada H&E. Nukleus berwarna biru.

Sitoplasma mitokondria, silia dan butiran sel tertentu menodai nuansa merah dan merah muda. Sementara tulang rawan dan sebagian besar granula sel berwarna biru hingga ungu.

3. Pewarna Jaringan Ikat Mallory (Mallory Trichrome)

Salah satu yang paling indah dari semua pewarna untuk pemeriksaan mikroskopis. Beberapa modifikasi dari metode asli telah dikembangkan. Ini sering digunakan untuk membedakan serat ekstraseluler asidofilik dari sitoplasma asidofilik.

Bahan dasarnya adalah asam fuchsin, anilin biru, orange G dan asam fosfotungstat. Kolagen dan serat retikuler berwarna biru; inti dan otot polos berwarna merah; serat elastis berwarna merah muda; sel darah merah dan mielin berwarna oranye.

4. Metode Periodic Acid-Schiff (PAS)

Ini digunakan untuk menunjukkan struktur yang kaya akan makromolekul karbohidrat seperti glikogen, glikoprotein, dan proteoglikan yang ditemukan dalam substansi dasar jaringan ikat, membran basal dan lendir.

Metode ini bergantung pada oksidasi selektif oleh asam periodik dari gugus hidroksil bebas pada dua gugus hidroksil yang berdekatan yang mengubah alkohol menjadi aldehida. Aldehida kemudian dideteksi oleh reagen Schiff, yang menodai mereka dengan warna ungu kemerahan.

Komponen jaringan lainnya diwarnai sesuai dengan counterstain yang digunakan. Timbal-hematoxylin atau pewarna dasar lainnya sering menjadi counterstain.

5. Hematoksilin Asam Fosfotungstat (PTAH)

Ini adalah pewarnaan yang ideal untuk demonstrasi serat otot lurik dan mitokondria, yang berwarna biru. Sebuah counterstain sering tidak digunakan.

6. Pewarna Perak

Komponen jaringan tertentu yang disebut argyrphilic memiliki afinitas alami untuk garam perak. Glikoprotein dalam bahan ini mereduksi garam perak menjadi logam perak, menyimpan noda hitam di sekitar bahan argyrophilic.

Serabut retikuler dan granul dalam sel endokrin difus bersifat argirofilik. Biasanya counterstain tidak digunakan dan elemen seluler yang tidak diwarnai terlihat sebagai bayangan tidak berwarna.

7. Pewarna Sudan

pewarna untuk pemeriksaan mikroskopis ini digunakan untuk mewarnai lipid. Pewarna Sudan, misalnya, sudan IV, larut dalam tetesan yang mengandung trigliserida dan mewarnainya dengan intens.

Untuk menerapkan pewarna ini, perawatan harus dilakukan selama preparasi jaringan untuk mempertahankan lipid, yang sering terhapus oleh prosedur preparasi jaringan standar.

8. Pewarna Wright

Pewarnaan Wright adalah pewarna netral yang dihasilkan oleh interaksi pewarna asam dan basa, menghasilkan molekul garam yang besar dengan pewarna berwarna di kedua bagiannya.

Campuran tipe Romanovsky, (termasuk pewarna Wright dan Giemsa) adalah yang paling terkenal dari pewarna netral ini dan mereka dibentuk oleh interaksi metilen biru dan eosin.

 

Dengan pewarnaan Wright, sel darah menunjukkan empat sifat pewarnaan utama yang memungkinkan jenis sel dibedakan.

Basofilia (afinitas untuk metilen biru), azurophilia (afinitas untuk produk oksidasi metilen biru yang disebut azures, yang berwarna ungu kemerahan), acidophilia (afinitas untuk eosin), dan neutrofilia (afinitas untuk kompleks pewarna dalam campuran, yang pucat ungu).

9. Pewarnaan Verhoeff

Pewarna yang baik untuk jaringan ikat, terutama elastin. Elastin menodai warna coklat tua-hitam. Sebuah noda counter mungkin atau mungkin tidak digunakan dengan noda Verhoeff.

Itulah beberapa jenis pewarna untuk pemeriksaan mikroskopis. Anda dapat membeli CDH Eosine Blue for Microscopy – 25 Gram di Syaf Unica Indonesia.