Dalam melakukan teknik elektroporasi disesuaikan dengan sel dan bahan lain yang digunakan. Hal tersebut juga akan mempengaruhi perangan elektroporasi. Berikut adalah beberapa variabel yang perlu dipertimbangkan dalam memilih elektroporator.

https://www.creative-biolabs.com/

Variabel yang perlu dipertimbangkan dalam memilih elektroporator

Tipe sel yang akan digunakan

Tidak ada satu protokol elektroporasi tunggal yang bekerja untuk semua jenis sel. Proses perlu dioptimalkan atau dikonfigurasi untuk setiap percobaan. Biasanya vendor elektroporasi dapat menyediakan parameter awal untuk beragam jenis sel.

Sebelum memutuskan sistem elektroporasi terbaik, pertimbangkan jenis sel yang akan dicoba transfeksi. Apakah mereka sel primer yang rapuh atau garis sel yang kuat dan abadi? Apakah mereka eukariotik atau prokariotik? Bagaimana dengan sel punca? Masing-masing sel tersebut membutuhkan serangkaian kondisi yang berbeda.

Tegangan pulsa minimum di mana membran sel dapat diserap dapat sangat bervariasi dengan diameter sel, mulai dari 530 volt untuk sel lima mikron pada suhu kamar dengan kuvet dua millimeter.

Hingga 30 volt untuk sel 80 mikron. Tegangan juga bervariasi dengan suhu. Sel lima mikron yang dapat ditembus dengan 530 volt pada suhu kamar membutuhkan 1.100 volt pada 4°C. Informasi tersebut diperoleh berdasarkan Manual Aplikasi Dasar untuk sistem Multiporator® Eppendorf.

Apa pun fokus penelitian yang akan dilakukan, pastikan sistem dapat menangani jenis sel yang diantisipasi untuk digunakan. Misalnya, sebagian besar perangkat elektroporasi hanya bekerja dengan sel suspensi atau dengan sel penyokong yang telah ditripsinisasi dan dimasukkan ke dalam suspensi. N

Sistem yang dapat dikonfigurasi

Variabel yang perlu dipertimbangkan dalam memilih elektroporator yaitu sistem elektroporasi dapat berupa “terbuka” atau “tertutup”. Elektroporator terbuka memungkinkan pengguna untuk mengonfigurasi semua pengaturan, seperti panjang pulsa, intensitas pulsa, bentuk gelombang, dan sebagainya.

Hal tersebut merupakan opsi pengguna pada daya tingkat lanjut jika diperlukan. Sementara sistem tertutup tidak dapat dikonfigurasi pengguna. Sistem ini adalah “kotak hitam” di mana pengguna memilih program yang telah dirancang sebelumnya dan disediakan oleh pabrikan sehingga hanya perlu menekan “Mulai.”

Throughput yang dibutuhkan

Semua sistem elektroporasi dapat menangani sampel satu per satu. Bentuk yang paling umum menggunakan kuvet berlapis elektroda. Namun, sistem yang menggunakan ujung pipet logam tujuan khusus hanya menyedot sel di ujung Neon sekali pakai, masukkan ke Stasiun Pipet Neon dan pergi.

Namun apabila pengguna perlu melakukan elektroporasi sel senilai seluruh pelat mikrotiter, beberapa sistem memiliki modul opsional yang memungkinkan pengguna untuk mentransfeksi seluruh pelat sekaligus.

Banyak sel yang akan ditransfeksi

Elektroporasi biasanya membutuhkan jumlah sel yang relatif besar, karena sebagian besar dari mereka tidak akan bertahan dalam proses elektroporasi. Tetapi setiap sistem bervariasi dalam hal jumlah sel yang mereka butuhkan.

Jenis molekul yang perlu dikirim

Terakhir, pertimbangkan jenis eksperimen yang ingin dijalankan. Apakah akan mengirimkan DNA plasmid atau RNA kecil? Kromosom buatan ragi atau oligonukleotida? Kondisi yang bekerja untuk satu jenis asam nukleat umumnya berbeda dari kondisi lainnya, sehingga beberapa pengoptimalan mungkin diperlukan untuk aplikasi spesifik.

Itulah beberapa variabel yang perlu dipertimbangkan dalam memilih elektroporator. Pastikan Anda memilih elektroporator yang tepat untuk kebutuhan eksperimen Anda. Seperti elektroporator yang tersedia di Syaf Unica Indonesia.

Syaf unica Indonesia menyediakan elektroporator untuk melakukan elektroporasi universal yang dapat digunakan dalam mentransfeksi sel in vitro, in vivo, in ovo, dan sel penyokong. Klik di sini untuk informasi produk elektroporator selengkapnya https://syaf.co.id/product/gemini-twin-wave-electroporator/.

 

WEBSITE || SYAF.CO.ID