Ekstraksi asam nukleat dilakukan untuk melakukan berbagai aplikasi biokimia. Pada artikel kali ini kami akan membahas mengenai prosedur ekstrasi asam nukleat otomatis.

https://www.biomedic.com..vn

Mengenal ekstraksi asam nukleat

Ekstraksi asam nukleat digunakan dalam tes dan diagnosis biokimia molekuler. Ekstraksi asam nukleat menjadi langkah pertama untuk melakukan kloning, transformasi, pencernaan enzim, transkripsi in vitro, amplifikasi, dan pengurutan.

Namun, karena banyaknya protein, karbohidrat, metabolit, dan kontaminan lain dalam sampel asli, tidak mudah untuk mengekstrak asam nukleat berkualitas tinggi. Hal ini diperlukan untuk menerapkan sistem ekstraksi asam nukleat pendukung dan reagen ekstraksi asam nukleat untuk menyelesaikan ekstraksi asam nukleat sampel secara otomatis.

Prinsip ekstraksi dan pemurnian asam nukleat

Berikut ini adalah prinsip ekstraksi dan pemurnian asam nukleat:

• Integritas struktur primer asam nukleat harus dijamin;
• Menghilangkan polusi dari molekul lain.

Untuk memastikan studi struktur dan fungsi asam nukleat, struktur primer yang lengkap adalah persyaratan paling dasar. Hal tersebut dikarenakan semua informasi genetik disimpan dalam struktur primer.

Struktur primer asam nukleat juga menentukan bentuk tingkat tinggi dari struktur dan makromolekul biologis lainnya. Pemurnian asam nukleat harus memenuhi tiga persyaratan berikut:

• Tidak ada pelarut organik dan konsentrasi ion logam yang terlalu tinggi yang dapat menghambat enzim dalam sampel asam nukleat;
• Polusi makromolekul biologis lainnya seperti protein, polisakarida, dan molekul lipid harus diminimalkan;
• Menghilangkan kontaminasi molekul asam nukleat lainnya, seperti RNA yang harus dihilangkan saat mengekstraksi molekul DNA, dan sebaliknya.

Hal yang harus diperhatikan dalam prosedur ekstraksi asam nukleat

Untuk memastikan integritas dan kemurnian asam nukleat yang diisolasi, berikut ini adalah beberapa hal harus diperhatikan selama percobaan:

• Mencoba untuk menyederhanakan langkah-langkah operasi dan mempersingkat proses ekstraksi untuk mengurangi kerusakan berbagai faktor berbahaya pada asam nukleat;
• Mengurangi degradasi asam nukleat oleh faktor kimia. Untuk menghindari kerusakan ikatan fosfodiester dalam rantai asam nukleat oleh asam dan basa berlebih, operasi sebagian besar dilakukan pada kondisi pH 4-10;
• Mengurangi degradasi asam nukleat oleh faktor fisik. Faktor degradasi fisik utama adalah gaya geser mekanis, diikuti oleh suhu tinggi.
• Untuk mencegah biodegradasi asam nukleat, berbagai nuklease di dalam atau di luar sel mencerna ikatan fosfodiester dalam rantai asam nukleat dan secara langsung menghancurkan struktur utama asam nukleat.

Prosedur ekstraksi asam nukleat

Langkah-langkah utama ekstraksi asam nukleat tidak lebih dari beberapa hal berikut ini:

• Mengganggu sel
• Menghilangkan protein yang terikat pada asam nukleat, polisakarida, lipid dan makromolekul biologis lainnya
• Menghilangkan molekul asam nukleat yang tidak diinginkan lainnya
• Mengendapkan asam nukleat
• Menghilangkan garam, pelarut organik dan kotoran lainnya
• Memurnikan asam nukleat.

Skema ekstraksi asam nukleat harus ditentukan sesuai dengan karakteristik bahan biologis spesifik dan molekul asam nukleat yang akan diekstraksi.

Untuk molekul asam nukleat yang diperkaya dalam organel tertentu, skema ekstraksi organel terlebih dahulu kemudian mengekstrak molekul asam nukleat target dapat memperoleh kelengkapan dan molekul asam nukleat dengan kemurnian tinggi dan kualitas tinggi.

Alat ekstraktor asam nukleat otomatis

BIOSET MagXtractor Automatic Nucleic Acid Extractor PCR MACHINE EXTRACTOR merupakan alat yang digunakan untuk melakukan prosedur ekstraksi asam nukleat otomatis. Alat ini didasarkan pada prinsip bahwa batang magnet pada rak batang magnet menyerap butiran magnet dan memindahkannya ke tangki reagen yang berbeda.

Hal ini dapat digunakan untuk mengekstrak asam nukleat dan protein dari berbagai sampel. Alat ini dapat mengoperasikan 1-32-48 sampel secara bersamaan dengan menambahkan sampel deteksi dan reagen ke 96 pelat lubang dalam. Dibandingkan dengan operasi manual tradisional, proses ekstraksi asam nukleat lebih sederhana dan otomatis.

BIOSET MagXtractor Automatic Nucleic Acid Extractor PCR MACHINE EXTRACTOR dapat Anda beli melalui website Syaf Unica Indonesia. Semoga informasi mengenai prosedur ekstraksi asam nukleat otomatis bisa bermanfaat untuk Anda.